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高分客户文章成功发表在Nature Plants、Cancer Research等知名期刊-辉骏生物

在进行蛋白质组学研究时，有五大取样原则，其中“代表性”原则最为重要，取样的代表性关系到实验结果是否具有科学意义，因此在选择样品时应该根据研究目的慎重选择样品类型。经常有人吐槽血液、血浆、血清傻傻分不清楚，叶片、根茎不知如何选择？不要慌，辉骏生物向你介绍如何严谨选择样品。

广州辉骏生物科技股份有限公司，以近10年的蛋白质组学服务经验，及完善的分生、细胞、互作分析等上下游实验平台，成功为50余篇SCI论文提供高品质核心数据。现隆重推出TMT三级质谱(MS3)定量技术服务！

因我司业务发展需要，自2019年9月19日起，将原公司“广州辉骏生物科技有限公司”变更登记为“广州辉骏生物科技股份有限公司”。因公司名称变更给您带来的不便敬请谅解，名称变更后的新公司将一如既往地为您提供优质服务。

外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。

单链抗体（Single chain Fv，ScFv）是由一段弹性连接肽（Linker）把抗体可变区重链（VH）与轻链（VL）相连而成，是具有亲代抗体全部抗原结合特异性的最小功能结构单位，以分子量小（仅为完整抗体的1/6）、穿透力强、体内半衰期短、免疫源性低、可在原核细胞系统表达以及易于进行基因工程操作等特点而备受关注，近年来已在生物学、医学领域、实验室研究及疾病的诊治方面取得了长足的进展。但单链抗体常常又存在亲和力低、功能单一、稳定性较差、体内清除过快等不足，使它的广泛应用受到一定限制。因此，近年来在ScFv的基础上发展了结合性能良好的ScFv多聚体-Diabodies、Tribodies及Tetribodies等，这些多聚体之间的转换仅依赖Linker长度的变化，氨基酸从12个缩至0，则Diabodies转换为Tribodies，Tetribodies。这些多价、多效能、高亲和力的新型小分子抗体较单链抗体具有诸多优势，有关其制备及应用已进行了较深入的研究。

外泌体（exosomes）是细胞分泌的纳米级小泡，这些微囊泡的直径通常约30-150纳米，内部包含蛋白质、RNA等重要细胞分子。之前的研究表明，外泌体可作为癌症、神经退行性疾病、肾脏疾病的诊断标志。近几年外泌体的分离技术得到了明显的进步和发展，外泌体分离方法哪种好呢?下面各大方法详细介绍:

转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。分为物理介导方法：电穿孔法、显微注射和基因枪；化学介导方法：如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法：有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率最高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。需要指出的一点，无论采用哪种转染技术，要获得最优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态到转染方法的操作细节。辉骏生物下面列举一些细胞转染6大影响因素

辉骏生物腺病毒感染目的细胞预实验 实验目的：确定腺病毒感染目的细胞的最低病毒量，各个细胞株的腺病毒转导效率都不太一样， 其中尤以淋巴细胞株最难转导。

多重连接探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)是MRC-Holland在2002年开发的一种分子技术。它是一种灵敏的技术，可以快速有效地定量核酸序列。它在世界各地的许多实验室进行，可用于检测基因的拷贝数变化(如缺失或复制)，识别DNA的甲基化状态，检测单核苷酸多态性(SNPs)和点突变，量化mRNA。因此，它被应用于许多研究和诊断领域，如细胞遗传学、癌症研究、人类遗传学等。

外泌体都有哪些分离提取方法？对于外泌体研究，分离和收集外泌体是非常关键的一步。目前对于外泌体收集有：超高速离心、密度梯度离心、磁珠免疫、超滤法、聚合物沉淀等几种主要方法，各种方法均存在不同优缺点。

做分离纯化工作的实验人员大多苦恼该如何选择合适的填料？通过优化组合找到高效的纯化工艺，使用最少的步骤达到蛋白质产量和纯度的最大化。辉骏生物带你介绍以下填料选择方法： 1、测定-分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH。

检测目的基因是否进入到受体细胞的方法，一般包括分子水平检测和个体水平检测。其中分子检测有3个层次：1目的基因是否整合到受体细胞染色体DNA上;2目的基因是否转录出MRNA，3目的基因是否翻译出蛋白质。1和2都可以用DNA分子杂交技术检测;3可以用抗体-抗原的方法检测。个体水平的检测包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否具有抗性及抗性的程度；基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较等。 stern杂交──蛋白质分子（抗原—抗体）之间的杂交。它是检测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法。

1983年，外泌体被人类发现，当时被认为是是细胞废弃物而未受关注，2013年，诺贝尔生理学或医学奖授予了在细胞内囊泡（外泌体）运输调控机制领域作出重要贡献的三位科学家，将外泌体相关研究的热度推向高潮。由于在临床上的巨大应用价值，近几年外泌体成为科研热点，相关论文发表数量呈爆炸式增长，2017年外泌体相关SCI论文多大2000篇，2018年仅上半年相关SCI论文就达到近1500篇。 过去四年来，国自然项目中，外泌体的中标项目飙升，成为国自然“宠儿”，今天为就来介绍几个个查询检索外泌体内容物的数据库，下面这些你都用过吗？

科研人员在分析项目的过程中，碰到这样的问题：通过各种手段（选择清除分析、比较基因组学分析、转录组分析）获得的行驶某种功能的某基因，如果进行实验的验正呢？一般分为：基因上调（基因转染法）、基因下调（基因干扰法）后看蛋白表达水平、细胞功能改变、在体动物模型中相关功能的变化等。

抗原修复有多种，有些抗原适合酶解修复，有些抗原适合热修复。两种抗原修复方法即热修复法（称之为热诱导抗原表位修复或 HIER）和酶解法。那么选择哪种方法，以达到抗原全面表达的最佳状态，看下方对五种抗原修复方法的详细介绍：

对于每个大肠杆菌表达的目的蛋白，确定其产生、定位及估计培养基或细胞中的产量都相当重要。为了简化确定工作，通常对总细胞蛋白及培养液、周质、可溶胞质和不溶胞质部分进行小规模分析。分析的结果有利于诱导条件优化或确定大规模诱导条件，以及采用合适的蛋白抽提方法用来纯化目的蛋白。下面简单的介绍总细胞蛋白的提取与分析。

请问流式细胞术单抗直接荧光需要几种对照？ 首先确认你用的直标抗体的荧光染料是什么，再确定该抗体的来源种属，选择相应的同型对照。如：你现在想检测小鼠淋巴细胞表面的CD4抗原， 荧光染料为FITC， 抗体来源为大鼠的IgG1亚型， 即Rat anti Mouse CD4-FITC （IgG1）， 你所需要的同型对照就应该是Rat IgG1-FITC， 一般的抗体说明上都会写清。

免疫酶染色法是酶免疫组织化学染色的关键步骤。它分为酶标抗体法和非标记抗体酶法，下面我们针对酶标抗体法的直接法和间接法，非标记抗体酶法的酶桥法和PAP法做详细的介绍：

RNA 不仅是基因和蛋白的桥梁(mRNA)，而且是细胞器的组成成分(18s rRNA 等)及基因表达调控的重要因子(miRNA、lncRNA、circRNA)，以 RNA 为中心的分子互作研究也是生物有机体生命活动(如器官发育分化、疾病发生等)规律阐释的重点内容。辉骏生物提供的以 RNA 为中心的分子互作研究技术，包括筛选型的 ChIRP-MS/ChIRP-Seq 和 RNA pull-down_MS，及验证型的 ChIRP-WB/ ChIRP-QPCR 和 RNA pull-down_WB 等。