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98 人阅读发布时间:2024-11-14 15:17
His pull-down MS实验思路:
(1) 检测大肠杆菌中的带His标签的诱饵蛋白(His-Bait)是否表达及其表达水平;
(2) His-Bait与待测样本孵育做pull-down实验,收集pull-down洗脱产物;
(3) Western-blot检测洗脱液中的诱饵蛋白,确保pull-down实验成功;
(4) LC-MS/MS检测洗脱液中的蛋白成分。
建议包括以下分组:
|
组别 |
对照组1 |
对照组2 |
实验组 |
|
His |
+ |
- |
- |
|
His-Bait |
- |
+ |
+ |
|
样本总蛋白 |
+ |
- |
+ |
|
预期western-blot结果 |
无His-Bait蛋白 |
有His-Bait蛋白 |
有His-Bait蛋白 |
|
预期质谱结果 |
无His-Bait蛋白 |
有His-Bait蛋白 |
有His-Bait蛋白 |
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实验组数据扣除2个对照组数据,得到差异蛋白 |
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